1、染色程序：切片用甲醛―钙固定10分钟；蒸馏水洗；60％异丙醇浸洗；1由红O染液10分钟(染液可回收再利用)；
2、60％异丙醇分色至背景五色；蒸馏水洗；Mayer苏木精复染；自来水洗(蓝化)1～3分钟；蒸馏水洗；甘油明胶封片。结果：组织细胞中脂滴呈橘红色，核呈蓝色。
3、注意事项：由于脂肪易溶于有机溶剂，所以一般用冰冻切片染色来显示。作脂肪染色的冰冻切片不能太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。
4、苏木素复染时间不能过长。染色结果不能长期保存，应尽快观察。以上便是油红O染色步骤，油红O染色常用作染脂肪。脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
5、脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。
6、称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至100ml，棕色瓶密封(或锡箔纸包裹避光)4℃保存，为储存液，可长期保存。用时取6ml加三蒸水4ml混匀，定性滤纸过滤，稀释后数小时内用完。
