怎样配制HA-HI试验用四单位抗原

 时间:2024-10-22 06:43:41

1、为什么要用四单位病毒经过大量的试验数据显示,只有四单位的病毒抗原浓度才能最好的反应血清抗体的水平,四单位是人为规定的。

怎样配制HA-HI试验用四单位抗原

2、试验前准备准备好配制四单位抗原所需的所有材料,包括病毒抗原、PBS缓冲液、1%鸡红细胞、单道和多道移液器及吸头、20ml青瓶及塞子、96孔微量血凝板等。

怎样配制HA-HI试验用四单位抗原

3、测定病毒的血凝滴度(HA试验)如何测定病毒的血凝滴度,详见本小编的百度经验“”“血凝(H钽吟篑瑜A)试验操作攻略”一文。假设测得的血凝滴度为2的8次方,则四单位病毒的稀释倍数为2的6次方(2的8次方除以4),即64倍稀释。

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4、计算抗原用量根据所需的四单位抗原的总量来确定抗原液的用量。比如,需四撮劝丛食单位抗原总量为20ml,则利用公式:抗原原液*64(稀释倍数)=20ml,求出抗原原液的体积为0.312ml,需要PBS缓冲液的体积约19.7ml,根据计算的结果配置即可。

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5、配制四单位抗原取PBS缓冲液19.7ml,加入20ml的小青瓶中,取0.312ml的病毒抗原液,加入到缓冲液中,盖上塞子,充分混匀,最好用涡旋仪混匀,至此,四单位抗原配制完成。

怎样配制HA-HI试验用四单位抗原

6、使用四单位抗原是进行HI试验必须的,使用前还要进行四单位的验证,验证成功后就可以用了。

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