相对于湿法装柱,干法港粕登漪装柱有其方便的地方,但是最大的缺陷是容易产生气泡,导致柱子变花。我个人绝大部分情况下,只要使用硅胶都采用湿法装柱,弋讥孜求使用氧化铝过柱子时才采用干法装柱,因为氧化铝在洗脱剂中不会形成溶胶,因此也无法使用湿法装柱。下面简要介绍干法装柱步骤。
第一,塞棉花。取一小块棉花铺平,弄成和层析柱直径一样的圆形,放入层析柱底部,可以用一根较长玻璃棒压着棉花,但注意不要把棉花塞的太紧。
第二,加氧化铝,加满后缓慢抽出玻璃棒,轻轻敲击柱子侧面,直至氧化铝不再沉降。可以用橡皮管辅助敲击,这样力度较大,又不至于敲碎层析柱。
第三,油泵抽柱子,或者其它方法压柱子,确保氧化铝压实,否则氧化铝中残留的大量气体会导致装柱失败。
第四,加洗脱剂(淋洗剂)。可以多加些洗脱剂,走柱子的时间长一些,这样可以充分赶走气泡,而且使得洗脱剂与氧化铝之间的作用达到平衡,不至于产生新气泡。
