细菌计数方法

 时间:2024-10-13 06:33:08

1、第一种细菌计数板:细菌计数板和血球计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察;而血球计数板较厚,不能使用油镜,计数板下部的细菌不易看清

2、取一定体积的样品细菌悬液置于细菌计数板的计数池内,用显微镜观察计数。由于计数池的容积是一定的(0.02mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数。本法简便易行,可立即得出结果。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子也可采用血球计数板进行计数。

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3、第二种麦氏比浊管:麦氏比浊管可以自己配制,也可购买商品化标准麦氏比浊管,将制备的菌悬液与0.5麦氏浊度的标准麦氏比浊管比较,浊度相同即为0.5麦氏浓度的菌液。该方法使用肉眼观察浊度,误差较大。

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4、第三种分光光度计:一般实验室有分光光度计也可以测细菌悬液的浊度,根据美国CLSI(以前称N觊皱筠桡CCLS)推荐的方法,将菌液调整至OD(625傧韭茆鳟)值在0.08-0.13之间就相当于0.5麦氏浊度了[5]。但是,由于不同细菌折光率是不同的,所以这只是一种粗略的换算关系,只具有一定的参考价值。

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5、第四种平板菌落计数法:取一定容量的细菌悬液,制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释醺尬汰栎液中分别取出1ml置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每ml原始样品中所含细菌菌落总数[7]。此法灵敏度高,是临床微生物检验工作中最常用的活菌计数法。

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