1、将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍,晾干备用。
2、配制琼脂糖凝胶。 ①称取0.5g琼脂糖,置干净的100ml 锥形瓶中,加入40ml蒸馏水,微波炉内加热使琼脂糖彻底溶化均匀。 ②待胶凉至60--70 ℃,依次向其中加入9ml甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5μ|溴化乙锭,混合均匀。 ③灌制琼脂糖凝胶。
3、样品准备: ① 取DEPC处理过的500μ|小离心管,依次加入如下试剂: 10x MOPS缓冲液2ul,甲醛3.5μ|,甲酰胺(去离子)10μ|,RNA 样品4.5μ|,混匀。 ② 将离心管置于60℃水浴中保10分钟,再置冰上2分钟。 ③ 向管中加入3μ| 上样染料,混匀。
4、上样。
5、电泳:电泳槽内加入1XMOPS缓冲液,于7.5V/ml 的电压下电泳。
6、电泳结束后,在紫外灯下检查结果。