变性梯度凝胶电泳(DGGE)操作细节

 时间:2024-10-19 02:43:52

DGGE技术理论上能驴织裕篡够区分1bp差别的序列,但是在实际操作中,可能性极低,是不可能的,怎样才能跑出一张好图呢?有以下需要注四歹吭毳意的事项:

一、制胶前,一定要充分溶解,最好超声以下,不然胶不均匀

二、缓冲液要记得看,不要太脏了

三、胶最好充分凝固,一般晚上离开实验室制胶,第二天早上取胶比较好

四、点样的时候最好用微量进样器,避免污染和样品漂浮

五、两边一定点一些样品,这样可以避免边缘效应

六、跑胶的时候电压不要太高,太低也不好,我一般采用120V,跑6个小时

七、要是银染技术很好,最好用银染,然后扫描,这样图片好看

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