1、配制MRS肉汤培养基,配制MRS肉汤培养基的时候要注意加入抗坏血酸钠,因为双歧杆菌是厌氧的益生菌,很容易受到氧气的毒害。
2、MRS肉汤经118℃灭菌15min冷却后,将两歧双歧杆菌BB01和BB03(我们实验室自己命名)的篑阁犹迎冻干菌粉分别接种于灭菌后冷却后的培养基中,37℃恒温培养24h。然后取出,再接种于另一个灭菌后冷却了的培养基中;依次接种三次培养。我们使用的培养基都是用厌氧管(带盖的)进行培养。因为双歧杆菌事厌氧的。
3、将培养后的双歧杆菌和培养基混合液,倒入离心管中,用离心机4000转,15min,滤掉上清液便可以得到双歧杆菌菌泥。用0.85%的生理盐水,适当稀释便得到高浓度的双歧杆菌菌悬液。