人脐带MSC培养基使用方法

 时间:2024-10-25 06:32:09

人脐带间充质干细胞培禾孀嵛羟养基使用方法:

1.使用显微镜观察细胞融合率超过80%方可进行传代培养;

2.把培养基用37摄氏度水浴进行预热;

3.去除掉原培养瓶内的培养基(此过程需要在超净台内完成),用适量PBS清洗,然后使用1毫升0.25%胰酶-EDTA消化细胞;

4.使用显微镜进行观察,当细胞变圆并且开始出现脱离瓶壁时,使用5毫升的人脐带间充质干细胞培养基终止消化;

5.将瓶壁上剩余的细胞用移液器轻轻吹打并将其打散;

6.室温、200g离心力、离心5分钟;

7.弃上清,加入15-20ml的人脐带间充质干细胞完全培养基重悬细胞后转入3-6个细胞培养瓶中或按适当比例接种到细胞培养瓶中(细胞贴壁后融合度在20%左右),细胞密度在1x104cells/cm2,轻摇细胞培养基,确保细胞均匀分布;

8.将得到的培养瓶培养于无菌、37摄氏度、5%CO2的培养箱中;

9.每两天为一个周期进行换液使用新鲜、预热的人脐带间充质干细胞完全培养基操作。

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