RNase 是什么物质

 时间:2024-10-28 14:41:41

指能水解RNA磷酸二酯键的酶称核糖核酸酶(ribonuclease,RNAse)。不同的RNAse其专一性不同,例如牛胰核糖核酸酶(RNAse I)。

它的作用位点是嘧啶核苷3’一磷酸与其他核苷酸之间的连接键,而核糖核酸酶T1(RNAse T1)的作用位点是3’鸟苷酸与其他相邻核酸之间的5’一OH间的连键。

RNase 是什么物质

核糖核酸酶A的主要用途为

1、从DNA:RNA杂交体中去除未杂交的RNA区。

2、确定RNA或DNA中的单碱基突变的位置。在RNA:DNA或RNA:RNA杂交体中,若存在单碱基错配,可用RNAse A识别并切割。通过凝胶电泳分析切割产物的大小,即可确定错配的位嚣。

3、RNA检测。RNA酶保护分析法(RNAse protection assay)是近年来发展起来的一种检测RNA的杂交技术。

其基本原理是利用单链RNA探针,与待测的RNA样品进行杂交形成RNA:RNA双链分子,由于RNA酶可专一性地降解未杂交的单链RNA,而双链受到保护不被降解,经凝胶电泳可以确定目的RNA的长度。

该方法灵敏度较Northern杂交法更高,并可进行较为准确的定量。选择适当的探针,还可进行基因转录起始位点分析及内含子(也称内元)剪切位点分析等研究。此法的灵敏度比核酸酶S1保护分析法高数倍。

4、降解DNA制备物中的RNA分子。须使用无DNAsd的RNAse(DNase I free RNAse),市售的一般RNAse A常含有DNAse,可在100 retool/I Tris—CI(pH 7.5)和15 mmol/l。NaCI溶液中100℃加热15 min,以去除之。

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