1、首先，将含有与pT28c的重组子的BL21菌落接种于50ml含卡那霉素的LB培养基中，在37摄氏度下进行振荡培养过夜。
2、然后，去含有重组子的表达菌液以2%-3%接种于1000ml含适当抗生素的LB培禾孀嵛羟养基中，在37摄氏度下振荡培养3-4小时，直至OD600达到0.5-0.6，取出1ml样品作为诱导前的样品，在-20摄氏度下保存。
3、然后，添加100mmol/L的IPTG直至终浓度为0.3-1mmol/L，继续培养3-5小时，取出1ml样品作为诱导后的样品，在-20摄氏度下保存。
4、然后，在4摄氏度的4000r/min下离心十分钟手机菌体，再弃去上清液，将其悬浮在3-4ml的缓冲液中。
5、然后，在-20摄氏度的冰箱中冻存过夜，在冰浴的条件下，超声波破碎，每次五秒、间断五秒，超声波总时间大半小时以上，超声波的功率采用200-300W。
6、最后，在4摄氏度9000r/min下进行离心二十到三十分钟，回收上清液作为粗酶液，取出30微升，添加10微升的4*SDS上样缓冲液，进行混匀，在作为超声波破碎细胞的上清液。
