1、首先,由于不同菌类的耐盐性不同,故常以此作为鉴别特征。一般可根据不同种类的菌种,选择其适合生长的培养液,在其中加入不同量的NaCI.接种后观察其生长与否,以判断其耐盐性。
2、然后,根据鉴定需要,以肉汤培养液配成不同浓度的NaCl 溶液,如浓度为2%、3.5%、5%.7%、10%等。培养基要求十分澄清,接种时应采用幼龄菌液直接接种,适温培养3~7d,与未接种的对照管对比,目测生长情况。
3、然后,细菌生长的最高、最适和最低温度常常是某些细菌鉴定的特征之一,如假单胞菌属中的有些种,在40C能生长,而在41~C 以上却不能生长。测定细菌的生长温度时,要求培养液十分清晰(如肉汤蛋白璎狡旌荞胨培养液),并采用液体菌种直针接种( 不用接种环接种)。放置于恒温水浴里培养。指示温度计应放在同样的试管和培养基内,在指定温度下培养2~5 d,观察生长情况。用接近OC的低温培养,则观察时间可延长至7~10d,甚至30d。
4、然后,目测生长情况,与未接种的空白培养基对比,注意混浊度、沉淀物和悬浮物等项,敛财醣沁并分级记录: 0++: 表示生长良好,与对照管相比,可清楚地判定是混浊的;+: 表示生长差,与对阖嚏逵藩照管相比,只有在某一观察角度时方能看到明显的混浊;-: 表示不生长,与对照管相比,在适宜的角度下观察,与对照无差异,培养6d,能生长者均按生长计,否则按不生长计。凡培养5d仍属可疑者或不生长者必须重测。在重测时,可能出现有时生长、有时不生长的不稳定现象,这可能有两种原因:一是水浴温度不稳定,在培养期间温度波动大; 二是可能所测温度恰好是测定菌的临界生长温度,在这种情况下,可用提高一度或降低一度的办法以肯定之。
5、然后,当测定的试管较多时,不可将试管捆成一捆浸于水浴中,否则会因内外温度不一而出现误差。故最好用特制试管架放试管,所用的温度十也应用标准温度标定过。
6、最后,形成芽孢的培养基,形成芽孢是芽孢杆菌科的关键特征,但不是所有的芽孢杆菌都能在任何情况,下形成芽孢。在鉴定细菌时,为了确定是否是芽抱南,需要对那些在一般情况下不形成芽孢的细菌,采用生抱子培养,来确定是否能形成芽孢。