1、首先获得QPCR扩增数据（在之前经验中已涉及如何设置实验）。利用BIO-RAD CFX manager软件打开数据结果，通过“EXPORT——export all d锾攒揉敫ata sheet——excel 2007”导出数据至指定目录下。此处建议导出为EXCEL格式，方便后续直接打开作进一步格式调整
2、进入文件目录，找到并打开数据表“quantification amplification results”，此表中即包含QPCR过程中每一个循环结束产生的荧光信号强度值。（注意：此时输出的数据结果是线性关系，作图前需要进行log转换）
3、打开graphpad 9，按照图示选择“group”创建绘图文件。复制EXCEL中数据，粘贴至graphpad 9中。
4、找到左侧graphs，单击数据标题“data1”，即可弹出绘图窗口，如图123设置各参数即可绘制出扩增曲线初稿
5、接下来对初稿进行优化，先将图片转换为彩色“change colors——colors”,然后调整一下绘图区大小“resize graph——to fill page”
6、双击纵坐标打开参数设置窗口，现在你可以观察到纵坐标的值是线性关系，这与我们QPCR的计算原惯栲狠疲理不符，所以我们要将纵坐标转换为对数值。在“left Y”子菜单下设置scale为“造婷用痃log2”,点击apply后可以看到扩增曲线发生了相应变化，但是存在较多噪声（X轴以上，红色实线以下区域）
7、降低/去除噪声。这里就相当于找“基线”，做法比较简单：改变Y蛹侦硫馕轴与X轴相交的最小值，同时设置Y轴的最小值。在“frame and origin”子菜单下set origin修改为“custom”,然后在X intersect Y axis at Y 输入一数值。然后点击apply。此时可观察到X轴相对上移。再在“left Y”子菜单下先去掉“automatically determine the range and interval”前的对号，并在range下minimum右侧输入最小值，可以看到X轴下方部分消失
8、最后，对图片整体参数（字体大小、标题、坐标轴粗细等）再稍作调整，即可导出为适合发表的图片。建议同时保存一份工程文件以便下次直接修改。在这里留一个疑问：怎么缩小扩增曲线CQ值（拐点）左侧占比？
