PCR实验室出现污染怎么处理

 时间:2024-10-12 11:03:53

1、SICOLAB方法一:把你所用的试剂更换批号,把所用的耗材等全部换掉,如果阴性对照结果继续阳性,那么最有可能的是气溶胶污染了。最简单的做法就是通风,将污染物稀释掉,并用次氯酸钠等擦拭、紫外线长时间照射。我们之前碰到过一次类似情况,就是采用此种方法,连续处理了将近2个月污染状况才有效解决。

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2、SICOLAB方法二:开门通风,卸掉实验室玻璃,空气流动会稀释拷贝数。PCR室千万不要密封装修,密封是SB,出现污染就杯具了。PCR的概念是无核酸,不是无细菌。以后PCR实验室严格按照分区操作进行,避免污染。

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3、SICOLAB方法三:紫外灯照射至少半小时空气中喷上酒精,然后,1mol/l的盐酸擦拭,反复几次,几天后在做隔夜测试。

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4、SICOLAB方法四:多年的经验是,只要认真注意,第一轮PCR(我做的是普通PCR需要开盖跑电泳)的污染基本可以避免。我比较奇怪的是,大家写到,荧光定量PCR会经常出现污染,一般而言,荧光定量PCR是封闭式操作的,气溶胶的污染大大降低,荧光PCR要出现污染的话,提示大家对污染的认识不是很够,PCR前的吸样、提DNA过程需要提高技术、避免交叉污染。酒精等擦拭、紫外灯照射后PCR污染不再出现,并不是酒精有多么降解DNA的能力(酒精对DNA片段基本是无能无力的),而是您所在的实验室污染并不严重而已,需要继续提高警惕。发生严重污染的话,确实是没有太好办法的,这对检验科PCR是一种沉重的打击。但巢式PCR的污染是时常会出现的,需要小心小心再小心;发生污染,如果有条件,有商品化的DNA降解溶剂,比如DNAaway,DNA-ExitusPlus等;如果没条件,用84也有用,开窗通风也是好的选择。另外,PCR能不频繁做,就不频繁做,越频繁,越容易污染。能一次做50个,不要分开5次每次做10个。做PCR就难免在假阴性和污染之间纠结。假阴性还好,可以优化条件出条带,污染了,往往难回头!

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