1、测定抗原的血凝价（HA）进行HI试验之前首先要进行HA试验，以测定抗原的血凝价，关于具体的试验操作请参照小编的百度经验“血凝HA试验操作攻略”，此处不赘述。
2、配置四单位抗原HI试验要用“四单位抗原”进行试验，如何配置四单位抗原呢？举例说明，比如测定的诠译邻词抗原血凝价为2的9次方，需要10ml的四单位抗原，那么所需抗原原液的体积计算公式为：脍篙守酬抗原原液*（2的7次方）=10ml，也就是说将抗原进行2的7次方稀释。计算出抗原原液用量，再计算所需PBS稀释液的体积。详细请参考本小编百度经验“怎样配置HA-HI试验用四单位抗原”。
3、按比例稀释取6个1.5mlEP管，分别加入100微升、200微升、300微升、400微升、500微升、600微升PBS缓冲液，然后每管均加入100微升配置好的四单位抗原，充分混匀，备用。
4、PBS铺板将移液器调至25微升，取96孔板一个，每孔各加25微升PBS铺底。
5、加稀释过的抗原将按比例稀释过的抗原（1:1、1:2至1:6）依次加入96孔板的第一排内前6孔，重复四次（也就是使用96孔板的前四排）。
6、加1%鸡红细胞抗原加入完毕后，最后一步将板子的前四排、每排前6孔分别加入25微升1%鸡红细胞，第5排仅加红细胞作为试验对照，置于25℃反应20min。
7、结果读取作用20min后取出板子，读取结果。如果第5排红细胞对照全部流下来说明对照成立。试验前4排孔中，每排第1孔、第2孔、第3孔完全凝集，而第4孔、第5权芄绂萄孔、第6孔部分凝集甚至不凝集，则说明四单位验证成功，可以进行下一步试验，否则需要调整抗原或者稀释用PBS的体积。
