1、净化车间应保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种环、剪刀及玻璃笔等。严禁堆放杂物，以防污染。无菌室应备有工作浓度的消毒液 ，如 5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液等等。需要带入净化车间使用的仪器、药品、玻璃器皿等一切物品，均应包扎严密或应经适宜的方法灭菌。如培养皿、吸管用不锈钢筒装好在160℃-170℃的干燥箱中灭菌 1h~2h；生理盐水用高压灭菌器于121℃灭菌20分钟等。
2、净化车间使用前必须打开净化车间和缓冲间的紫外灯辐照30分钟以上，并且同时打开净化风机进行换气。 在紫外灯关闭后半小时方可进入无菌室进行工作。在样品检验完毕后，应及时清理剩余样品和各种药品及玻璃器皿，安全退出后再打开所有紫外灯辐照灭菌30分钟。送检样品在检验前应保持外包装完整 ，不得开启，以防污染。检验前，用75％的酒精棉球消毒外表面，必要时用点燃的酒精棉进行灭菌。每次操作过程中，均应做空白对照 ，以检查无菌操作的可靠性。
3、吸取菌液时 ，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管，如吸管碰到手及其它未灭菌的物体，必须重新更换，以防污染。接种针每次使用前后 ，必须通过火焰燃烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。带有菌液的吸管、试管等器皿应浸泡在盛有5％的来苏儿溶液的消毒桶内消毒，24h取出冲洗；培养皿则需在高压灭菌器中重新灭菌后方可处理营养基，切记不要直接冲入下水道中，防止阻塞。如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5％石碳酸溶液或 3％的来苏儿倾覆在被污染处至少 30min，再做处理，工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。
